內毒素與鱟試劑的反應原理
鱟系海產動物，生物學分類上屬節肢動物門肢口綱劍尾目。在其血液中含有一種特殊的變形細胞（
amoebocyte
）。這種變形細胞中含有能被內毒素啟用的
C
因子、
B
因子、前凝固蛋白，因此，內毒素檢測
LT
法（鱟變形細胞溶解物試驗）的機理即是內毒素透過啟用
C
因子、
B
因子、前凝固酶，而使可凝固蛋白變成凝固蛋白（肉眼可見的凝膠），從而可以半定量及定量地測知內毒素的含量（圖
1
）。
日本學者在對可凝固蛋白氨基酸順序研究的基礎上，發現內毒素啟用的凝固酶的作用點為可凝固蛋白的第
18
（
Arg
）和
19
（
Ghr
）間的肽健，以及第
46
（
Arg
）和
47
（
G1y
）間的肽鍵，而裂解為
A
鏈、
B
鏈及
C
肽。且在切斷部位的羧基端氨基酸的結構均為
-
G1y
-
Arg
，提出此酶的作用有特異性（圖
2
）。產色基質內毒素檢測法即是據此原理而設計的。
一般地講，內毒素與鱟試劑的反應是非常特異的，因此，
LT
法的假陽性極少。從革法蘭氏陽性菌分離出的肽聚糖雖亦能凝固鱟試劑，但其活性比內毒素低
1000~
4
00000
倍。
近來發現一種新的合成抗癌劑羧甲基（
1
→
3
）
-
β
-D
-
葡聚糖亦能與鱟試劑起反應。其反應原理是：鱟試劑中含有一種稱為
G
因子的物質，此抗癌劑能啟用鱟試劑中的
G
因子，而活化的
G
因子又依次啟用前凝固酶、可凝固蛋白，從而形成凝膠（圖
2
）。至此凝血酶、凝血激酶，
Poly
I：C
Po1yA：U
、核糖核酸酶、胰蛋白酶等，亦可凝固鱟試劑而引起假陽性反應。
哺乳類動物血漿中含一種酯酶，它對內毒素有降解及脫毒的作用，故用
LT
法檢測血漿中的內毒素易受此種物質的影響，而造成假陰性結果。為了避免此等因素的影響，在試驗前血漿需經過特殊處理。目前共有下述四種方法處理血漿，即稀釋加熱法、酸化值液、氯-仿浸取法及凝膠過濾法。我們及其它的一些工作者認為稀釋加熱法簡便易行，效果較好。
在鱟血液中，還有一種稱之為抗
LPS
因子（
Anti - LPS - factor
，
ALF
）的蛋白物質，分子量約為
15KDa
，為一種鱟血抗凝劑，對
LPS
介導的
LT
反應有直接的抑制作用。
ALF
可抑制
LPS
對
LT
反應的初始
。
階段。因此在製備鱟試劑時，應將此物質清除。除去
ALF
及加入
Ca++
（
o。o2M
）可改善鱟試劑的質量，提高敏感性約
100
倍。
免責宣告：
本文節選自：《內毒素的檢測與鱟實驗（一）》，文章作者：餘慶。如有侵權，請聯絡刪除，謝謝！
